iTRAQ/TMT定量蛋白質組學(xué)
技術簡介
iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantification）和TMT(Tandem Mass Tags)同位素标記定量技術是分别由SCIEX公司和Thermo公司研發(fā)的一種(zhǒng)體外同種(zhǒng)同位素标記的相對(duì)與絕對(duì)定量技術。該技術利用多種(zhǒng)同位素試劑标記蛋白多肽多肽的氨基基團，經(jīng)高精度質譜串聯分析，可同時(shí)比較多達8-16種(zhǒng)樣品之間的蛋白表達量。
技術流程
iTRAQ/TMT試劑由三部分組成(chéng)：報告基團、平衡基團和反應基團。反應基團形成(chéng)8-16種(zhǒng)等質量同位素标簽；試劑标記酶解後(hòu)的肽段，可與氨基酸N端及側鏈的伯胺基團發(fā)生反應。在一級譜圖中，來自于不同樣本的同一肽段，标記後(hòu)表現爲相同的質荷比。在二級譜圖中，報告基團、平衡基團和反應基團之間的鍵斷裂，帶不同同位素标簽的同一肽段産生質量不同的報告離子，根據報告離子的豐度可獲得樣本間相同肽段的定量信息，再經(jīng)過(guò)軟件處理得到蛋白質的定量信息。
實驗周期
自送樣起(qǐ) 15個工作日
技術特點
A、蛋白通量高、分析範圍廣，适合廣泛樣品類型，動物組織、植物、細胞、細菌等；
B、定量準确，可信度高，實驗可重現性高；
C、可同時(shí)對(duì)2-16種(zhǒng)不同條件樣品進(jìn)行蛋白質差異分析
适用範圍
适用于藥物作用靶點、疾病标志物篩選、發(fā)病機理等研究；
适用于植物品種(zhǒng)改良、作用機制研究、特殊蛋白篩選等；
儀器設備
Thermo Scientific Q Exactive HF-X
Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
Thermo Scientific Q Exactive
送樣需知
| 适用樣品 | 樣品類型 | 推薦送樣量 | 最低送樣量 | 寄送方式 | 歡迎咨詢 |
| 細胞 | 貼壁細胞、懸浮細胞 | 1×107個細胞 | 5×106個細胞 | 幹冰寄送 （省外幹冰量需保證有15kg-20kg，避免由于運輸過(guò)程時(shí)間關系造成(chéng)樣品降解） |
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| 動物組織 | 常規組織（心，肝，皮，肉等） | 200mg | 50mg | ||
| 特殊組織（眼球，毛發(fā)，腦、骨頭等） | 200mg | 100mg | |||
| 植物組織 | 植物葉片 | 200mg | 50mg | ||
植物根、莖、果實、種(zhǒng)子 | 1g | 500mg | |||
藻類植物 | 1mL | 200uL | |||
| 微生物 | 革蘭氏陰性細菌 | 200ul | 100uL | ||
| 革蘭氏陽性細菌 | 1mL | 500uL | |||
| 真菌 | 3g | 1g | |||
| 液體 | 血清(收集好(hǎo)的全血室溫靜置2h，避免劇烈晃動以免發(fā)生溶血) | 1mL | 100uL | ||
| 血漿（收集好(hǎo)的全血加入抗凝管中，輕輕颠倒5-10次混勻，靜置30min（避免劇烈晃動以免發(fā)生溶血） | 1mL | 100uL | |||
| 尿液 | 5mL | 1mL | |||
| 腦脊液、唾液、羊水 | 2mL | 200uL | |||
| 細胞上清 | 25mL | 10mL | |||
| 外泌體 | 300uL | 100uL |
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